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β型溶血性鏈球菌的生物學特性
β型溶血性鏈球菌：鏈球菌屬中一類在血平板上能形成β型溶血圈的細菌，以釀膿（或A群）鏈球菌及無乳（或B群）鏈球菌為主。
生物學特性：革蘭氏陽性菌，呈球形或橢圓形，呈鏈狀排列，長短不一，從4-8個至20-30個菌細胞組成不等，鏈的長短與細菌的種類及生長環境有關。該菌不形成芽孢，無鞭毛，需氧或兼性厭氧菌，營養要求較高。
流行學特征：廣泛分布于自然界、人及動物糞便和健康人的鼻咽部。可通過直接接觸、空氣飛沫傳播或通過皮膚、粘膜傷口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會對人類進行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位β型常成為食品污染的污染源。
對人毒力較強，產生β型溶血的A群鏈球菌引起化膿性感染、中毒性疾病及超敏反應性疾病。產生β型溶血的B群鏈球菌能引起牛乳房炎，嚴重危害畜牧業，該菌也能感染人類，尤其是新生兒可引起敗血癥、腦膜炎、肺炎等，死亡率極高，并可產生神經系統后遺癥。
β型溶血性鏈球菌的檢驗
操作注意事項
1：當對易產生較大顆粒的樣品（如肉類）進行檢測時，建議使用帶 濾網均質袋，以方便均質后用吸管吸取勻液；
2：使用均質袋進行前增菌時，應使用帶有底托的均質袋架子，防止培養過程中前增菌袋子歪倒泄漏污染培養箱；
3：在使用VITEK2 Compact全自動微生物分析系統進行鑒定時，應結合其他生物學特性綜合評價后判斷結果。如遇待測菌鑒定評分過低，多個生化反應結果不符貨48h生化反應仍不明顯的情況，應考慮鏈球菌乳化程度不夠，呈顆粒狀，不能形成均勻的菌懸液有關，此時應重復試驗或改用其它方法鑒定；
4：培養箱中疊放培養皿時，為防止中間平皿過熱，高度不得超過6個平板。
培養基原理解析
? 胰蛋白胨、植物蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氫二鉀為緩沖劑；氯化鈉維持均衡的滲透壓；多粘菌素及萘啶酮酸用于抑制非鏈球菌的生長。
2、哥倫比亞CNA血平板
? 酵胰酪蛋白胨、動物組織 蛋白消化液、酵母提取物、牛肉提取物、淀粉提供碳氮源、維生素和生長因子；羊血是細菌生長繁殖的良好營養物質。在45～50℃的基礎培養基中加入血液可以保存血液中某些不耐熱的生長因子，同時血球不被破壞。瓊脂是凝固劑，多粘菌素B、萘啶酸能抑制雜菌生長。
灰白色、半透明、光滑、圓形邊緣整齊菌落，具有無色透明的溶血環
生化鑒定原理解析
1、觸媒試驗
? 大多需氧和兼性厭氧菌均產生過氧化氫酶，但鏈球菌屬陰性，故常用此試驗來鑒定。
? 結果判讀：立即產生氣泡+，不產生氣泡-。
? 不宜用血平板上生長的菌落，因紅細胞含有過氧化氫酶，可致假陽性反應。
β型溶血性鏈球菌 觸酶+
2、鏈激酶試驗
? 健康人的血漿中含有一種酶原，稱為胞漿原。胞漿原在正常狀態下不活動，如被溶血性鏈球菌產生的激活酶作用后，胞漿原即變為活動性的胞漿素，能溶解纖維蛋白。
? 結果判讀：血漿混合物凝固后36±1℃繼續培養24小時，凝塊重新溶解為陽性。
質量控制及疑難解析
質量控制
1、實驗室過程中，每批預增菌液、選擇性增菌液、分離平板等都要做空白對照。以掌握檢驗過程中是否存在來自檢驗環境的污染。
2、定期使用β型溶血性鏈球菌ATCC19615或相應定量活菌參考品，在P2實驗室或陽性對照實驗室內，用適當的食品樣品進行陽性實驗驗證，污染劑量應控制在10-100CFU/25g，并進行記錄，驗證實驗至少每2個月進行1次。
3、每2個月將所使用的培養基和生化試劑用的標準菌株或陰性菌株進行驗證，并進行記錄。
疑難解析
問：在前增菌或選擇性增菌結束后，肉湯未見微生物生長，是否可以終止實驗？
答：不可以，因為肉湯可見的細菌濃度為107CFU/ml，在此濃度一下，肉眼不能發現微生物生長，但實際溶液中有微生物生長。
問：β型溶血性鏈球菌和乙型溶血性鏈球菌是一種菌嗎?
答：是的，同一種不同名稱。
問：β型溶血性鏈球菌為什么要在厭氧條件下培養?
答：厭氧條件下哥倫比亞CAN選擇性瓊脂平板更適合溶血性鏈球菌的分離培養，主要表現為菌落形態典型、溶血現象更為明顯，同時抑制了需氧菌及干擾菌的生長。
所需培養基試劑
用途 | 貨號 | 名稱 | 規格 |
增 菌 | 024051 | 胰蛋白胨大豆肉湯（TSB） | 250g/瓶 |
024051P1 | 胰蛋白胨大豆肉湯（TSB） | 250g/瓶 | |
SR0310 | 改良胰蛋白胨大豆肉湯培養基配套試劑 | 10支/盒 | |
平 板 分 離 | 024066 | 哥倫比亞瓊脂培養基 | 250g/瓶 |
SR0420 | 哥倫比亞CNA血瓊脂配套試劑 | 10支/盒 | |
CP0910 | 哥倫比亞CAN血平板 | 90mm×20個 | |
純 培 養 | 024061 | 哥倫比亞瓊脂培養基 | 250g/瓶 |
CP0160 | 哥倫比亞血平板 | 90mm×20個 | |
生化鑒定 | 029180 | 革蘭氏染色液 | 10mL×4瓶 |
029270 | 凍干草酸鉀兔血漿 | 10支/盒 | |
029280 | 0.25%氯化鈣溶液 | 10支/盒 |
