黃曲霉毒素檢測(cè)方法
發(fā)布時(shí)間：2024-12-09 瀏覽次數(shù)：202
黃曲霉毒素在自然界中廣泛存在，對(duì)人和動(dòng)物會(huì)產(chǎn)生毒害，具有極強(qiáng)的致癌和致突變作用，在食品生產(chǎn)和農(nóng)作物貯藏過(guò)程中比較常見(jiàn)。要想控制食品及農(nóng)作物中黃曲霉毒素的含量，就必須充分了解黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)及其特性。本文現(xiàn)就黃曲霉毒素的檢測(cè)方法、去除方法進(jìn)行總結(jié)。
1、黃曲霉毒素的檢測(cè)方法
1.1 薄層層析法
是一種少量、快速、便捷的檢測(cè)方法，既可以用于鑒定純凈物，又可以分離混合物，并提純和檢測(cè)其含量。其吸附原理主要是利用黃曲霉毒素B1的溶解性，將樣品提取濃縮后在薄層板上分離，于波長(zhǎng)356 nm處進(jìn)行紫外光照射，根據(jù)其薄層上顯示的熒光最低檢出量來(lái)測(cè)定其含。薄層層析法屬于最傳統(tǒng)的方法，但由于其操作步驟多、樣品前處理繁瑣，誤差非常大，已越來(lái)越不適合現(xiàn)代分析的要求。
1.2 高效液相色譜法
高效液相色譜法屬于色譜法的一種，它是利用樣品溶液里的幾種物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)不同，從而流出色譜柱的順序不同，進(jìn)而達(dá)到了分離的目的。這種方法優(yōu)點(diǎn)在于靈敏度很高、時(shí)間較短、適用于多種以及大量樣品的分析，一般在10～25 min之內(nèi)就可以得到檢測(cè)結(jié)果，且樣品溶液和色譜柱都可以回收利用；但是此方法所需要的儀器較為先進(jìn)且昂貴，對(duì)技術(shù)的要求較高，故并沒(méi)有得到廣泛使用 。
1.3 酶聯(lián)免疫吸附法
酶聯(lián)免疫吸附法是基于抗原與抗體的特異性結(jié)合以及后續(xù)的霉對(duì)底物顯色反應(yīng)的高效催化作用，在發(fā)生一系列的生理免疫反應(yīng)后，通過(guò)儀器可檢測(cè)出被酶催化生成產(chǎn)物的量，進(jìn)而就可以計(jì)算出樣品中的抗體(或抗原)量。酶聯(lián)免疫吸附法是目前國(guó)際上認(rèn)可的一種檢測(cè)黃曲霉毒素B1科學(xué)而有效的方法，并且還可以檢測(cè)乳制品里的黃曲霉毒素M1。該方法比較便利，檢測(cè)成本低廉、特異性強(qiáng)、靈敏度和效率也相對(duì)較高，是實(shí)驗(yàn)室主要的檢測(cè)方法，也是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法之一。
1.4 金標(biāo)試紙法
是利用疏水膠(又稱膠體金)標(biāo)記單克隆抗體而設(shè)計(jì)的定性或定量檢測(cè)方法。測(cè)檢樣品溶液里的黃曲霉毒素時(shí)，溶液中的黃曲霉毒素B1與試紙上的標(biāo)記抗體相結(jié)合，使抗體的結(jié)合點(diǎn)被其所占據(jù)，進(jìn)而抑制了金標(biāo)抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合，使之沒(méi)有任何變化；相反，如果樣品溶液中沒(méi)有黃曲霉毒素B1，就不能阻止標(biāo)記抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合，從而就會(huì)產(chǎn)生顏色較深的色帶，呈紅色。此方法具有快速、方便、靈敏度較高等特點(diǎn)，準(zhǔn)確度在85％以上，可以測(cè)出樣品中20 ng／g的黃曲霉毒素，一般在5～10 min就可以得到檢測(cè)結(jié)果 。
2、黃曲霉毒素的去除
2.1 理化去除法
（1）觀察挑選法。一般分布稻谷中的黃曲霉毒素大部分集中于稻殼層和谷皮、胚層，可以直接挑選出來(lái)，然后再進(jìn)行碾磨加工，可以去除其中的一大部分，但是這種方法比較耗費(fèi)時(shí)間，在工業(yè)生產(chǎn)上很少使用。
（2）吸附法(挑選霉?fàn)睿シ畚?。吸附法屬于一種物理方法，就是用多孔性的固體吸附劑將樣品里的雜質(zhì)吸附到其表面，從而使雜質(zhì)與所需要的樣品分離。在日常生活中和實(shí)驗(yàn)室里常見(jiàn)的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭和焦炭等，一般活性炭的使用較為廣泛。水合鈉鈣硅酸鋁是最有效的吸附劑，已經(jīng)成功地用于吸附黃曲霉毒素B1。黃曲霉屬于微生物，少量黃曲霉產(chǎn)生的毒素聚集一起呈粉末狀，一般在花生油里常檢測(cè)到，由此可利用吸附劑吸除花生油里的大部分毒素，以膨潤(rùn)土作為吸附劑吸附花生油里的黃曲霉毒素也有明顯的效果。有些黃曲霉毒素吸附劑含有中草藥，這種吸附劑可以同動(dòng)物飼料一同混合，動(dòng)物食用后對(duì)其肝臟具有保護(hù)作用，并能去除其體內(nèi)殘留的黃曲霉毒素，對(duì)生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，且具有保健效果。
2.2 生物去除法
（1）乳酸菌黏附法。乳酸菌種類繁多，有的乳酸菌對(duì)人體有利，如嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌等，都屬于有益菌，具有改善動(dòng)物腸道、促進(jìn)消化和生長(zhǎng)、增強(qiáng)自身免疫能力等功效。乳酸菌黏附法是通過(guò)乳酸菌自身黏附作用和其所分泌代謝產(chǎn)物的抑菌作用，在腸道內(nèi)與其他厭氧菌共同形成生物學(xué)屏障，通過(guò)分泌有機(jī)酸和過(guò)氧化氫等物質(zhì)抑制病原菌，從而起到保護(hù)作用。
（2）其他微生物的去除黃曲霉毒素作用。生物學(xué)方法去毒是利用微生物(如食用菌、綠色木霉等)及其所產(chǎn)生的酶來(lái)去除毒素，使毒素降解失活，失去毒性作用。某些微生物可以吸附黃曲霉毒素，與黃曲霉毒素形成復(fù)合體，當(dāng)微生物形成復(fù)合體后，自身的吸附能力會(huì)下降，就比較容易與黃曲霉毒素一起排出體外，從而降低毒素的危害。這種方法不需要用到其他的化學(xué)試劑，沒(méi)有污染并且效率較高，是理想的去毒方法。
參考文獻(xiàn)：[1]李昆,姚婷,寧雪雪,等.黃曲霉毒素的研究進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工：下, 2017(6):4.
聲明：本文來(lái)源網(wǎng)絡(luò)，僅用于交流學(xué)習(xí)，如涉及侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系刪除。
